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叶绿素光谱分析:ATP2000或ATP5001

发表时间:2016-04-30 16:10


         叶绿素光谱分析:ATP2000或ATP5001



  背景

  叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中,并在植物细胞中与蛋白质结合为叶绿体。 当植物细胞结构遭到破坏或细胞死亡后,叶绿素即游离出来,游离叶绿素不稳定,对光、热敏感。高等植物中叶绿素有两种:叶绿素 a 和 b,两者均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。在分子结构上,叶绿素是脂溶性卟啉类化合物,由脱镁卟啉环、叶绿酸、叶绿醇、甲醇和二价镁离子等部分构成;在光学特性上,叶绿体色素 80% 丙酮提取液中叶绿素 a 和 b 及类胡萝卜素分别在 663nm,646nm 和 470nm 波长下有最大吸收峰,而 95% 乙醇提取液中它们则在 665nm,649nm 和 470nm 波长下具有最大吸收峰。

  常用的检测叶绿素含量的方法为:分光光度法、原子吸收光谱法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法等,其中,分光光度法应用较为广泛。叶绿体色素溶液各组分在可见光谱中具有不同的特征吸收峰。因此,应用分光光度计在某一特定波长下所测定的吸光度,即可计算出色素溶液中各色素浓度。

     

               图1 植物叶片 (左) 显微镜下植物叶片细胞 (右)

实验搭建

    1. 微型光纤光谱仪 ATP2000或ATP5001(380~960 nm);

    2. 氘卤灯光源 ATG2010

    3. 紫外光纤 FIB-600-UV

    4. 比色皿支架 R4


测量结果与分析

     
     

图2,叶绿素吸收光谱


    上图为通过 ATP2000或ATP5001光谱仪测量所得绿萝叶片叶绿素光谱,由于没有进一步利用有机溶剂分别萃取,因此叶绿体色素中的叶绿素 a,叶绿素 b 的光谱谱峰有一定程度叠加,但是仍可标记出叶绿素 a 和叶绿素 b 的最大吸收峰。

     结论

  运用复享光纤光谱ATP2000或ATP5001,可以进行快速植物叶绿素光谱测量。通过对测得叶绿素吸收光谱作进一步分析,可实现叶绿素的含量测定。


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