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分光光度计附件的选择

发表时间:2024-03-01 16:38

1.前言

传统的分光光度计检测手段只能用于常量液体的检测,满足不了日益增加的样品测试需求。用户可以通过添加不同附件来拓宽检测范围,针对不同样品物理状态以及不同样品量对附件进行选择。

2.不同样品的附件选择

2.1 液体样品比色皿的选择

日常测试中,基本都选用10mm的标准比色皿,其容量为2.5ml。但如果样品浓度高超出系统的线性动态检测范围的情况下,根据朗伯比尔定律,则需缩小光程,选择光程较小的比色皿(图一)或者稀释样品。若样品峰强度较低,难以实现准确定量,将比色皿光程从 1 cm 增大到 10 cm(图二),使样品的吸光度增大,有助于实现更准确的定量。若样品属于有毒或易挥发物质,客户则可选择带盖的比色皿(图三)

图一二三

针对于500µL微量样品,可以选择半微量样品池(图四)。针对于50µL微量样品,则可以选择超微量样品池(图五六)。针对光孔小,微量,测DNA之类的情况,我们会选用黑壁比色皿(图五六)。

图四五六

需要在线检测或样品属于流动的情况,则选择流动样品池(图七)。该样品池可与恒温圆柱形池支架兼容,具有超高的灵活性。

图七

2.2 薄膜支架

图八

该支架(图八)可以用来测试样品的透过率、反射率、放射率、太阳能转化率。替换成该附件后,软件会根据客户选择,自动来计算不同的测试光或不同波段范围下的透过率。并且形成谱图。

Dλ・Vλ:根据CIE昼光D65的光谱分布和CIE亮度标准比视感度计算出重价系数

τt:每个波段的透过率(%)

Eλ・Δλ:表示太阳光标准光谱分布的重价系数

τt:每个波段的透过率(%)

2.3 漫反射附件

漫反射附件(图九)专为测量粉末样品漫反射而设计。光线平行照射到水平放置的样品上,样品上方两个大的半球面镜收集漫反射光。再将反射光直接投向仪器检测器。该附件相较于传统积分球存在几点优势:

①适用于极小样品,可对直径小至 3 mm 的样品进行测试

②可用于必须保持水平的样品,如粉末、液体或糊剂

图九

2.4 积分球

于测试不透明的固体、粉末等材料的反射率,或者半透明液体、悬浊液体的透射率。这些样品表面的反射和透射情况比较复杂,常规的紫外可见分光光度计无法进行准确的测定,所以需要使用积分球附件完成测试。对于悬浊的液体样品来说,溶液中的小颗粒引起的光散射使得样品的测量十分困难,也需要使用积分球进行此类分析

积分球(图十)又称为光通球,是一个中空的完整球壳, 其典型功能就是收集光。积分球内壁涂白色漫反射层(一般为MgO或者BaSO4),且球内壁各点漫反射均匀。光源在球壁上任意一点上产生的光照度是由多次反射光产生的光照度叠加而成的。采用积分球的目的是为了收集所有的漫反射光,而通过积分球来测漫反射光谱的原理在于:由于样品对紫外可见光的吸收比参比(一般为BaSO4)要强,因此通过积分球收集到的漫反射光的信号要弱一些,这种信号的差异可以转化为紫外可见漫反射光谱。采用积分球可以避免光收集过程引起的漫反射的差异。

图十

漫反射的定量分析:利用K-M方程可以实现漫反射的定量研究,具体公式为:

f(R∞)=(1-R∞)2/2R∞=K/S

R∞代表样品层无限厚时的反射率(实际上几个毫米就能满足)

K为样品的吸光系数

S为样品的散射系数

由此,我们可以看出:

1. 实际上,从上面的积分球方法中我们也可以看出,人们通常测量的不是绝对反射率R∞,而是一个相对于标准样品(一般为BaSO4)的相对反射率。

2. 样品的漫反射和入射光波长相关

3. 在一个稀释的物种的情况下F(R∞)正比于物种的浓度,类似于朗伯比尔定律

三、产品推荐

1)综合概述:

奥谱天成倾力研发的紫外可见分光光度计UV3200是一款适用范围广,性能稳定的研究级分光光度计。其采用了比例检测双光束系统,能够使仪器具有更高的稳定性,极低的杂散光;自动消除光源和样品变化所引起的误差使得测量结果更加接近真实值。

UV3200采用特有的波长控制系统,使波长精度更高;精确的带宽,使测试数据更准确;高性能的光电转换器,使仪器的灵敏度更高;配置超低杂散光的双单色器系统,实现8Abs测定;选用品质有保证的光源,确保光源的稳定可靠。

UV3200软件采用全中文设计,简洁美观,易于操作还具有光谱扫描,光度测量,时间扫描,动力学测量,数据传输,保存,打印等功能。

UV3200还具有宽大的样品室可以容纳用于光谱和漫反射测试的大附件和积分球附件,丰富的附件能应对各种应用要求进行自由扩展。


图为UV3200

技术参数


型号
UV3200
波长范围
190-900nm
测光方式
双光束
样品池通道数
6通道,自动切换
光源
氘灯、卤素灯
探测器
光电倍增管
测光类型
吸光度(Abs),透射率(%),反射率,能量(E)
波长准确度
±0.3nm
波长重复性
±0.05nm
分辨率
0.1nm
光谱带宽
0.1、0.2、0.5、1、2、5nm
杂散光
0.00005%以下(220nm,NaI)
测光范围
吸光度:-8~8Abs
测光准确性
±0.002Abs(0.5Abs)、±0.003Abs(1Abs)、±0.006Abs(2Abs)、±0.3%T
光度重现性
±0.001Abs(0.5Abs)、±0.001Abs(1Abs)、±0.003Abs(2Abs)、±0.1%T
基线平直度
±0.0004Abs(200-860nm)光源点亮一个小时后
基线稳定度
0.0003Abs/h以下(700nm)光源点亮一个小时后
噪声水平
0.00005Abs
使用温度
15-35℃
使用湿度
30%~80%
仪器尺寸
长850mm×宽400mm×高240mm

公众号长配图3.1.jpg



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